2 ، HotStart Taq PCR Mix

این محصول حاوی DNA پلیمراز HotStart Taq ، dNTPs ، MgCl است2، واکنش بافر ، تقویت کننده PCR ، بهینه ساز و تثبیت کننده ، با غلظت 2. مزایای سرعت تقویت سریع ، سادگی ، حساسیت بالا ، ویژگی قوی ، پایداری خوب و موارد مشابه را دارد و می تواند خطاهای عملکرد را تا حد زیادی کاهش دهد. برای واکنشهای PCR بسیار خاص و تقویت قالبهای پیچیده مانند محتوای GC بالا (> 60٪) یا قالبهایی با ساختارهای ثانویه و همچنین تشخیص ژن در مقیاس بزرگ و غیره مناسب است.

گربه خیر اندازه بسته بندی
4992321 1 میلی لیتر
4992322 5x1ml
4992316 5 × 1 میلی لیتر

جزئیات محصول

سوالات متداول

برچسب های محصول

محصول برجسته

تک لوله Taq MasterMix (صدور گواهینامه ملی محصول با فناوری بالا)

■ 2 × HotStart Taq PCR MasterMix ویژگی و حساسیت واکنش PCR را بهبود بخشیده و می تواند قالب های پیچیده با محتوای GC بالا ، ساختار ثانویه و موارد مشابه را تقویت کند. حداکثر 2 نسخه از قالب مورد نظر را می توان تقویت کرد و نتایج تجربی دقیق تری را تضمین کرد.

formula فرمول منحصر به فرد HotStart Taq MasterMix کل سیستم واکنش را بسیار پایدار می کند ، و فعالیت با یخ زدایی مکرر یا ذخیره طولانی مدت در 4 درجه تحت تأثیر قرار نمی گیرد.

solution محلول مخلوط PCR از پیش آماده و پایدار و کارآمد می تواند عملیات را سریع و ساده کرده و شدت کار و خطای نمونه برداری را تا حد زیادی کاهش دهد. تقویت کننده و بهینه ساز PCR با عملکرد بالا نیز در ترکیب گنجانده شده است ، که نیاز به شرایط PCR را کاهش می دهد.

این محصول دارای سیستم های حاوی رنگ و بدون رنگ است. محصولات MasterMix حاوی رنگ را می توان مستقیماً پس از PCR ، بدون افزودن بافر بارگذاری ، الکتروفورز کرد.

همه محصولات را می توان برای ODM/OEM سفارشی کرد. برای جزئیات ،لطفا روی خدمات سفارشی (ODM/OEM) کلیک کنید


  • قبلی:
  • بعد:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    س: بدون باند تقویت کننده

    الگوی A-1

    ■ الگو حاوی ناخالصی های پروتئینی یا مهارکننده های Taq و غیره است —— الگوی DNA را تصفیه کنید ، ناخالصی های پروتئینی را حذف کرده یا DNA قالب را با کیت های تصفیه استخراج کنید.

    den تغییر رنگ قالب کامل نیست —— به طور مناسب درجه حرارت تغییر رنگ را افزایش داده و زمان دناتوره شدن را طولانی می کند.

    deg تخریب الگو —— دوباره الگو را آماده کنید.

    آغازگر A-2

    quality کیفیت پایین آغازگرها —— آغازگر را دوباره سنتز کنید.

    ■ تخریب آغازگر —— آغازگرهای با غلظت بالا را برای حفظ به حجم کم تقسیم کنید. از انجماد و ذوب چندگانه یا نگهداری طولانی مدت 4 درجه سانتی گراد خودداری کنید.

    design طراحی نادرست آغازگرها (به عنوان مثال طول پرایمر کافی نیست ، دیمر بین پرایمرها ایجاد می شود ، و غیره) -طراحی مجدد آغازگرها (جلوگیری از ایجاد دایمر آغازگر و ساختار ثانویه)

    A-3 Mg2+تمرکز

    g منیزیم2+ غلظت بسیار پایین است —- منیزیم را به میزان مناسب افزایش دهید2+ غلظت: Mg را بهینه کنید2+ غلظت توسط یک سری واکنش از 1 میلی مولار تا 3 میلی مولار با فاصله 0.5 میلی مولار برای تعیین Mg بهینه2+ غلظت برای هر قالب و آغازگر.

    دمای پخت A-4

    temperature دمای پخت بالا بر اتصال پرایمر و قالب تأثیر می گذارد. —— دمای پخت را کاهش داده و شرایط را با گرادیان 2 درجه سانتی گراد بهینه کنید.

    A-5 زمان تمدید

    extension زمان تمدید کوتاه —— افزایش زمان تمدید.

    س: مثبت کاذب

    پدیده ها: نمونه های منفی نیز نوارهای دنباله هدف را نشان می دهند.

    A-1 آلودگی PCR

    ■ آلودگی متقاطع توالی هدف یا محصولات تقویتی —— احتیاطاً نمونه حاوی توالی هدف را در نمونه منفی پیپت نکنید یا آنها را از لوله سانتریفیوژ بیرون نریزید. معرفها یا تجهیزات باید اتوکلاو شوند تا اسیدهای نوکلئیک موجود از بین بروند و وجود آلودگی باید از طریق آزمایشهای کنترل منفی مشخص شود.

    cont آلودگی واکنش دهنده - - معرفها را حذف کرده و در دمای پایین ذخیره کنید.

    A-2 Primer

    g منیزیم2+ غلظت بسیار پایین است —- منیزیم را به میزان مناسب افزایش دهید2+ غلظت: Mg را بهینه کنید2+ غلظت توسط یک سری واکنش از 1 میلی مولار تا 3 میلی مولار با فاصله 0.5 میلی مولار برای تعیین Mg بهینه2+ غلظت برای هر قالب و آغازگر.

    design طراحی آغازگر نامناسب ، و توالی هدف دارای همسانی با توالی غیر هدف است. —— طراحی مجدد آغازگرها.

    س: تقویت غیر اختصاصی

    پدیده ها: نوارهای تقویت کننده PCR با اندازه مورد انتظار ، بزرگ یا کوچک ، ناسازگار هستند ، یا گاهی اوقات هم نوارهای تقویتی خاص و هم نوارهای تقویتی خاص ایجاد می شوند.

    آغازگر A-1

    prim ویژگی آغازگر ضعیف

    —— آغازگر طراحی مجدد.

    concentration غلظت آغازگر بیش از حد بالا است —— دمای دناتوراسیون را به درستی افزایش داده و زمان دناتوره شدن را طولانی می کند.

    A-2 Mg2+ تمرکز

    ■ Mg2+ غلظت بسیار زیاد است —— غلظت Mg2+ را بطور مناسب کاهش دهید: Mg را بهینه کنید2+ غلظت توسط یک سری واکنش از 1 میلی مولار تا 3 میلی مولار با فاصله 0.5 میلی مولار برای تعیین Mg بهینه2+ غلظت برای هر قالب و آغازگر.

    A-3 پلیمراز مقاوم در برابر حرارت

    amount مقدار بیش از حد آنزیم —— مقدار آنزیم را به طور مناسب در فواصل 0.5 U کاهش دهید.

    دمای پخت A-4

    temperature دمای پخت بسیار پایین است —— مناسب دمای پخت را افزایش دهید یا روش پخت دو مرحله ای را اتخاذ کنید

    چرخه PCR A-5

    many چرخه های PCR بسیار زیاد —— تعداد چرخه های PCR را کاهش دهید.

    س: نوارهای تکه تکه یا اسمیر

    آغازگر A-1—— ویژگی ضعیف —— آغازگر را دوباره طراحی کنید ، موقعیت و طول آغازگر را تغییر دهید تا ویژگی آن افزایش یابد. یا PCR تو در تو انجام شود.

    الگوی DNA A-2

    —— الگو خالص نیست —— الگو را تصفیه کرده یا DNA را با کیت های تصفیه استخراج کنید.

    A-3 Mg2+ تمرکز

    —— میلی گرم2+ غلظت بسیار زیاد است - منیزیم را به میزان مناسب کاهش دهید2+ غلظت: Mg را بهینه کنید2+ غلظت توسط یک سری واکنش از 1 میلی مولار تا 3 میلی مولار با فاصله 0.5 میلی مولار برای تعیین Mg بهینه2+ غلظت برای هر قالب و آغازگر.

    A-4 dNTP

    —— غلظت dNTP ها بسیار زیاد است —— غلظت dNTP را بطور مناسب کاهش دهید

    دمای پخت A-5

    —— دمای پخت بسیار پایین —— به طور مناسب دمای پخت را افزایش دهید

    چرخه A-6

    —— خیلی چرخه —— شماره چرخه را بهینه کنید

    س: چه مقدار DNA الگو باید در یک سیستم واکنش PCR 50 میکرولیتر اضافه شود؟
    ytry
    س: چگونه قطعات بلند را تقویت کنیم؟

    اولین قدم انتخاب پلیمراز مناسب است. پلیمراز معمولی Taq به دلیل عدم فعالیت اگزونوکلئاز 3'-5 'نمی تواند تصحیح شود و عدم تطابق ، کارایی گسترش قطعات را تا حد زیادی کاهش می دهد. بنابراین ، پلیمراز معمولی Taq نمی تواند به طور م fragثر قطعات هدف بزرگتر از 5 کیلوبایت را تقویت کند. پلیمراز Taq با اصلاح ویژه یا دیگر پلیمرازهای با وفاداری بالا باید برای بهبود کارایی پسوند و برآوردن نیازهای تقویت قطعه طولانی انتخاب شود. علاوه بر این ، تقویت قطعات بلند همچنین نیاز به تنظیم مربوط به طرح آغازگر ، زمان تغییر رنگ ، زمان تمدید ، pH بافر و غیره دارد. معمولاً ، آغازگرهایی با 18 تا 24 جفت باز می توانند منجر به عملکرد بهتر شوند. به منظور جلوگیری از آسیب رساندن به الگو ، زمان تغییر رنگ در دمای 94 درجه سانتی گراد باید به 30 ثانیه یا کمتر در هر چرخه کاهش یابد ، و زمان افزایش دما تا 94 درجه سانتی گراد قبل از تقویت باید کمتر از 1 دقیقه باشد. علاوه بر این ، تنظیم دمای فرمت در حدود 68 درجه سانتی گراد و طراحی زمان افزایش با توجه به سرعت 1 کیلوبایت بر دقیقه می تواند تقویت م ofثر قطعات بلند را تضمین کند.

    س: چگونه می توان وفاداری تقویت PCR را بهبود بخشید؟

    میزان خطای تقویت PCR را می توان با استفاده از DNA پلیمرازهای مختلف با وفاداری بالا کاهش داد. در میان همه پلیمرازهای Taq DNA که تاکنون یافت شده است ، آنزیم Pfu کمترین میزان خطا و بیشترین وفاداری را دارد (به جدول پیوست مراجعه کنید). علاوه بر انتخاب آنزیم ، محققان می توانند با بهینه سازی شرایط واکنش ، از جمله بهینه سازی ترکیب بافر ، غلظت پلیمراز حرارتی و بهینه سازی تعداد چرخه PCR ، میزان جهش PCR را بیشتر کاهش دهند.

    پیام خود را اینجا بنویسید و برای ما ارسال کنید